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紫锥菊在新兽药上的应用

所属分类:行业热点    发布时间: 2020-06-09    作者:
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紫锥菊(Echinacea purpurea)是原产美洲的菊科植物,为多年生草本,头状花序单生于茎或枝顶,其主要特征是花托为圆锥形,具有管状花或舌状花,通常为玫瑰色或紫色。已经开发为药品者主要为紫锥菊Echinacea purpurea及狭叶紫锥菊E.angustifolia,白松果菊E.pallia。紫锥菊是目前受到国际普遍重视的一种免疫调节剂。它的制剂销售额居欧洲和美国医药市场销售排名前5名,是闻名世界的“免疫”草药,具有突出的抗感染与促免疫的作用,受到国内外的极大关注,2012年6月,紫锥菊及其制剂被农业部批准为国家一类新兽药。

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一、新兽药名称及证号

名称:紫锥菊、紫锥菊末、紫锥菊溶液

证号:2012新兽药证字23、24、25号

二、化学成分

(一)多糖及糖蛋白

从狭叶紫锥菊和紫锥菊根中分离到3种糖蛋白,相对分子量分别为 17000、21000、30000,其中主要的糖为阿拉伯糖、半乳糖及葡糖胺,蛋白质部分主要含有天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸及丙氨酸。

(二)咖啡酸衍生物

紫锥菊地上部分及其根的乙醇提取物中含有咖啡酸类衍生物,是紫锥菊的主要活性成分,主要包括菊苣酸、绿原酸、咖啡酸、紫锥菊甙、菜蓟菊和异绿原酸等。

(三)脂肪酰胺类化合物

紫锥菊中含带有羰基共轭两个双键的脂肪酰胺,在白松果菊中主要含在 2 位上有羰基的酮基烯烃和酮基炔烃。结构为不饱和脂肪酰胺,其烷基部分为4个或5个碳的烷基。该类化合物在狭叶紫锥菊根部含量*高为 0.1009%~0.1151%,紫锥菊中含量*高为 0.10040%~0.10395%

另外,紫锥菊还含有精油(醋酸冰片酯、pentadeca-8en-2-one、大根香叶烯、石竹烯、石竹烯环氧化物)、黄酮类、倍半萜类、生物碱类、多炔类、植物甾醇类等。

三、药理活性

(一)免疫活性

紫锥菊多糖(EPS)100微克可明显刺激巨噬细胞杀p815瘤细胞的活性,其强度与0.1667μmol/s巨噬细胞活化因子相似。用活化的胸腺增殖法检测发现,EPS可提高巨嗜细胞产生白细胞介素的水平,并且可以刺激小鼠B淋巴细胞的增殖。

Luetting等人证明从紫锥菊中获得的不同浓度的多糖可以刺激巨噬细胞释放肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素β;

Wanger 分离出分子量在25000~50000甚至更高的多糖组分,碳粒廓清试验显示具有显著的免疫调节功能;

Coeugniet 也证实紫锥菊提取物对淋巴细胞刺激作用的产生和转化具有调节作用。从松果菊的汁液制成的制剂,经体内和动物实验证实能够增加粒细胞和巨噬细胞的活性。选择生长期的紫松果菊Echinacea植物(具有高含量的活性成分),用乙醇和水提取得到的提取物中含有紫松果菊酸、烷基酰胺类和多糖类。它能提高哺乳动物免疫系统的活性;提高巨噬细胞的吞噬功能;促进巨噬细胞产生 一氧化氮和肿瘤坏死因子。

(二)抗炎活性和抗菌活性

紫锥菊在北美和欧洲作为传统的抗炎药物使用。紫锥菊提取物在冰醋酸诱导的小鼠血管渗透性模型、角叉藻胶诱导的大鼠组肿胀模型与LPS诱导的大鼠巨嗜细胞TNF-α分泌模型中均表现出明显的抗炎作用。Stimal等用紫锥菊多糖处理感染白色念珠菌的小鼠,24小时后小鼠肾脏内的念球菌明显减少,表明紫锥菊可以抗念球菌的感染

(三)抗病毒、抗肿瘤活性

Binns SE 等发现紫锥菊的提取物对单纯疱疹Ⅰ型病毒有抑制作用。Wacker与Hilbig证实紫锥菊提取物具有抗流感病毒、疱疹病毒与水泡性口炎病毒的活性。张英涛等发现,紫锥菊提取物对流感病毒、萨克奇病毒、呼吸道合胞病毒具有不同程度的抑制作用。

用紫锥菊预处理的小鼠的巨噬细胞的细胞培养血清中,肿瘤坏死因子-α、IL-1、干扰素-β2、对抗肿瘤细胞的细胞毒性增加。紫锥菊细胞培养中分离的纯化多糖促进人白细胞的自动迁移并增加了这些细胞杀死Staphylococcus aureus的能力。

四、毒理学研究

迄今为止,用标准毒理学评价方法、动物实验均认为紫锥菊是完全无毒的。公司委托上海医药研究院研究了紫锥菊对小鼠溶血素、腹腔巨噬细胞吞噬功能以及NK细胞活性的影响,结果表明紫锥菊对动物的非特异免疫、体液及细胞免疫都具有增强作用。

(一)紫锥菊对小鼠溶血素的影响

将50只昆明种小鼠随机分为5组,紫锥菊高、中、低剂量组分别以2.25克/千克、0.75克/千克、0.25克/千克的剂量灌胃给药,对照药物高免多糖给药剂量为0.1克/千克,每日一次,连续给药2周。给药结束前4天每只小鼠腹腔注射20%的绵羊红细胞悬液0.2毫升。4天后眼球取血,分离血清,按500倍稀释,在1毫升稀释血清中加入10%0.5毫升绵羊红细胞,再加入1毫升经预处理的1:10豚鼠血清,37℃水浴10分钟后置入冰水终止反应。2000转/分钟离心10毫升,取上清液1毫升加3毫升都氏试剂,放置10分钟后在540纳米波长处测定OD值。

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紫锥菊三个剂量组均能剂量依赖性地提高小鼠的溶血素值,表明对小鼠溶血素抗体生成具有明显促进作用,说明该药可增强体液免疫。

(二)紫锥菊对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

试验分组和用药同上,小鼠腹腔内注射2%鸡红细胞2毫升/只,4小时后处死小鼠,用生理盐水冲洗腹腔,收集冲洗液,离心,倾去上清液,收集细胞涂片,晾干后用瑞氏染色液染色,油镜下观察。计数100个巨噬细胞吞噬鸡红细胞数,按下公式计算:

吞噬百分率=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/100个巨噬细胞数

吞噬指数=被吞噬的鸡红细胞数/100巨噬细胞数

紫锥菊三个剂量组均能剂量依赖性地提高对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率。

(三)紫锥菊对C57BL/6J小鼠NK细胞活性的影响

分组同及用药同上,断颈处死小鼠,无菌取脾,分离脾淋巴细胞,进行NK细胞活性测定。

由实验可知,紫锥菊高剂量组能够显著性地增强小鼠NK细胞的活性。

五、紫锥菊的临床药效

南京农业大学中兽药所进行了紫锥菊末对新城疫冻干苗的免疫增强实验。1日龄蛋公鸡,饲养至11日龄时随机分为7组,具体分组与处理如表4。

(一)新城疫抗体效价的动态变化

由此可见,21、28、35及42日龄时,紫锥菊末高剂量组和紫锥菊中剂量组抗体水平均显著高于药物对照和空白对照组。

(二)淋巴细胞增殖的动态变化

在21、35、42日龄,紫锥菊末高、中剂量组的A570值显著高于其余3组(P < 0.05),两组之间无显著差异(P > 0.05);紫锥菊末低剂量组和药物对照组显著高于疫苗对照组(P < 0.05)。

(三)攻毒免疫保护效果

攻毒后第3天,除紫锥菊末高剂量组外,各组鸡开始零星出现绿色稀便,但精神和饮食正常;到第4天时个别鸡出现精神沉郁、采食下降。紫锥菊末高剂量组无发病,紫锥菊末中剂量组的发病率*低,紫锥菊末高、中剂量组的发病率显著高于其余3组。

到第5天时,攻毒对照组、药物对照组和紫锥菊末低剂量组开始出现零星死亡,到第10天时死亡停止。紫锥菊末高、中剂量组无死亡,其余3组的死亡率显著升高。

至第14天时,所有存活鸡全部恢复健康。紫锥菊末高、中剂量组的免疫保护率达....,显著高于其余3组。

(四)免疫器官指数的变化(表8)

在21日龄,紫锥菊末3个剂量组的胸腺指数和法氏囊指数均高于药物对照组和疫苗对照组,紫锥菊末高剂量的脾脏指数高于其余各组。42 天时,紫锥菊末高剂量组的法氏囊指数、胸腺指数和脾脏指数高于其余各组。

(五)生长性能的变化(见本页底端表9)

在攻毒前(14~42天),各组的日均增重、采食量和料重比无显著差异。在攻毒后(43~56天),以不攻毒的疫苗对照组的*好。各攻毒组相比,日均增重以紫锥菊末高剂量组*高,其次为紫锥菊末中剂量组;料重比以攻毒组*高、显著高于其余攻毒组,紫锥菊末高剂量组*低。

六、适应症及用法用量

适应症:用于猪鸡疫苗免疫前后,可提高抗体滴度,延长抗体高峰时间;用于病毒性疾病如温和型流感、非典型新城疫、传染性法氏囊炎;猪蓝耳病、圆环病毒等的辅助治疗。

用法用量:紫锥菊末拌料每吨饲料加1000克;紫锥菊溶液 每吨水加1000毫升,连用5~7天。

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